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DNA亲子鉴定法之PCR扩增法介绍

作者:中正鉴定 发布时间:2015-07-04 21:41:14 人气:136

PCR的理论基础,源自体细胞的DNA复制,当DNA亲子鉴定复制时,某些酵素会将DNA双螺旋结构形成泡状之环,RNA聚合酶则分别以两股DNA为模板,合成一段RNA影子,DNA聚合酶再延生DNA,合成新的DNA,利用这样的原理要在细胞外进行DNA鉴定复制尚有一个困难点,就是在高温下难以有一种酵素能维持活性,以适时接解开DNA双螺旋结构,这在早期仅能以人工的方式,在高温下随时补充酵素,以维持其活性,但这以使得细胞外复制DNA成为一件高难度事情。所幸,不久后美国的黄石公园间歇及温泉中发现噬热细菌细胞中,可以分离高温的Taq聚合酶,这种酵素已完全使用高温环境,并可在稍低费电的97度高温下培育生存,而这正是解开DNA双螺旋所需的温度,使得吩咐加热变形的复制工作也变得简单。

PCR复制鉴定方法较简单,主要分析过程有下列三个步骤:

1,抽取DNA。

2,PCR复制:以一对位于DNA复制区两端之引物在含有耐高温的DNA聚合酶,四中核苷酸及DNA鉴定模板的缓冲液中,以三种不同温度分别执行DNA变形,引物结合及引物延伸,连锁反应复制得到大量特定DNA,这就是PCR产物。

3,PCR产物的鉴定:复制出具有多样性的特定DNA序列后,即须以电泳法、限制酶分解法,点墨杂交与定序法,鉴定出此多型DNA基因。更多亲子鉴定知识就在随州亲子鉴定http://suizhou.dna123.cn